��Ⱦ���|(zh��)�����DNA�p������z�y(c��)
ժҪ: ����h(hu��n)���е���Ⱦ���|(zh��)�܉�?q��)��C(j��)�w�z�����|(zh��)DNA��ɓp�����@ЩDNA�p�������γ�DNA�Ӻ���,��DNA朔��Ѽ��A���ÓQ��,�y(c��)��DNA�p���܉�ӳ�z���������|(zh��)��(du��)�C(j��)�w��Ӱ푳̶�,����ˣ�DNA�p���z�y(c��)��(du��)���u(p��ng)����Ⱦ���|(zh��)���О������Ҫ�����x,���������c(di��n)��B��Ŀǰ���еęz�y(c��)DNA�p���ķ���,����32P���(bi��o)ӛ���g(sh��)���A�Խ����������ǜy(c��)������,������DNA�p������ͱ��^��,���y(c��)��DNA�Y(ji��)��(g��u)�p���Դ����ஔ(d��ng)������y��DNA�p���ęz�y(c��)���g(sh��)����M(j��n)һ������,���`���Ⱥ͌�һ�����M(j��n)һ�����,��
�P(gu��n)�I�~�� ��Ⱦ���|(zh��) ;DNA�p�� ;�z�y(c��) ;�z������
1 ǰ��
�����(bi��o)־�Biomarker�����������w��¶�ڭh(hu��n)�����W(xu��)���|(zh��)������W(xu��)Ч��(y��ng)��׃��[1],���@�NЧ��(y��ng)���l(f��)��������,����(x��)��������,���О��������׃����[2],�������(bi��o)־����Á�z�y(c��)���u(p��ng)����Ⱦ���|(zh��)��(du��)�h(hu��n)���|(zh��)����Ӱ푲������A(y��)�����ڷ���ˮƽ��,��ͨ����ø���x���Ե����p��DNA�Y(ji��)��(g��u)�ēp��,��������Ⱦ��������(bi��o)־��,��Ó�����Ǻ��ᣨDNA�������������w�ļ�(x��)����(n��i),�����z����Ϣ���d�w,���κ�DNA���ӵĮ���׃������(hu��)��(d��o)��(y��n)�ص�����W(xu��)���[3]���Ļ���,���M��,�����١���(g��)�w,���NȺ,��Ⱥ��IJ�ͬ�Ӵα��F(xi��n)��Ч��(y��ng)�����,��DNA�p�������(bi��o)־����о�,��Խ��Խ�ܵ��˂����P(gu��n)ע�����Č�(du��)��Ⱦ���|(zh��)�T��(d��o)�����DNA�Y(ji��)��(g��u)�p���͙C(j��)��,�������ڜy(c��)��DNA�p���ļ��g(sh��)�c�����M(j��n)�оC��,��
2 DNA�Y(ji��)��(g��u)�p������C(j��)��
�ڼ�(x��)���˃�(n��i)��DNA���ӱ�����һ�N�ڷ�(w��n)�B(t��i)�ͷǷ�(w��n)�B(t��i)֮�g�Ą�(d��ng)�B(t��i)ƽ��,���������l����,���Ƿ�(w��n)�B(t��i)ֻ�������^�̆���(d��ng)�r(sh��)�ĕ��r(sh��)�F(xi��n)����DNA��(f��)�ơ������ڼ�(x��)�����x�е��S�C(j��)����ײ��,�����@�N��r��DNA�ēp���ܿ�ͱ��ޏ�(f��)[4],����׃���µķ�(w��n)���Y(ji��)��(g��u)��һ���֣����(f��)�ƺ��ޏ�(f��)������ʹ�C(j��)�w���������\(y��n)�D(zhu��n),��
��Ⱦ���|(zh��)�M(j��n)�������w��(n��i)��ͨ����(hu��)�_�y�ЙC(j��)�w������(x��)�����x�^��,����(d��o)��DNA�Y(ji��)��(g��u)�l(f��)����׃���Ķ��l(f��)��һϵ�м�(x��)�����},���ܶ�W(xu��)���|(zh��)��(j��ng)�^�w��(n��i)��øϵ�y(t��ng)�,���a(ch��n)�����g���x�a(ch��n)��@��Џ�(qi��ng)�H��ԵĴ��x����c֬�,������,��RNA��DNA���H�����İl(f��)������(y��ng)���γɷ�(w��n)����(w��n)���ļӺ���,����Ⱦ���|(zh��)�cDNA�Y(ji��)�Ͼ��γ�DNA�Ӻ��DNA Adducts��,���ܶ��о��ѽ�(j��ng)�C������N�T׃��������Ԯa(ch��n)���cDNA�Y(ji��)���γ�DNA�Ӻ���,��DNA�Ӻ����c����ͻ׃�������P(gu��n),��������[���l(f��)��������Ҫ����[5]������,���S��ù���أºͱ����ŵď�(qi��ng)���°�����,������DNA��(j��ng)�����ɞ�h(hu��n)���������(d��o)�µġ���Ⱦ���|(zh��)�cDNA���r(ji��)�Y(ji��)��,���������ĉA����λ����Щ�nj�һ��,����Щ�t��һ�̶��^��,����AFF�H�خ����������B���ʣ�-8λ�����黯���t�����ԭh(hu��n)���Ў����c��������ϵ�ȫ�����͵�ԭ��(�����B���������ϵĵ�����)�a(ch��n)���黯����,��DNA�Ӻ�����γɿ����Ǯa(ch��n)��DNAͻ׃�ĵ�һ�A��,���Ժ��(hu��)�l(f��)��ʹDNA朔��ѡ��A���ÓQ�͉A��ȱʧ��һϵ���¼�,��
�ܶ�����܉�����DNA�ֱ�Ӕ���,����������Ⱦ���|(zh��)��(j��ng)�^���x���ɵ����ɻ���ȥ�A��λ�c(di��n)���܉�����DNA���Ӄ�(n��i)��������I�Ĕ���,����Ⱦ���|(zh��)Ҳ�ܸɔ_DNA�����,����(d��ng)�����(f��)��,���������ޏ�(f��),���@Щ���܉�?q��)���׃�����A�������a(b��)��ȱʧ������Ⱦ���|(zh��)�����DNA�Y(ji��)��(g��u)��׃����C(j��)��Ҋ�±���
|
3 DNA�p���ęz�y(c��)
���ڭh(hu��n)�����}Խ��Խ�ܵ��P(gu��n)ע,���˂�?c��)ڲ���l(f��)չ�������`���ļ��g(sh��)��z�y(c��)���W(xu��)���cDNA�����ã��Ķ�ʹ�Ӻ������,�������ı���,��DNA朔���(DNA Strand Break)�Ĕ�(sh��)���ȳɞ�DNA�p������Ҫָ��(bi��o)��
3.1 DNA�Ӻ��P��y(c��)��
�����(sh��)�h(hu��n)�������ﹲ�r(ji��)�Y(ji��)�ϵ�������������Ҫ���õ����w������,����(du��)����a(ch��n)��ؓ(f��)��Ӱ�,���ЙC(j��)�����ﶾ�����úͻ��W(xu��)�°����^�̣�������?y��n)��ض����W(xu��)�ﹲ�r(ji��)�Y(ji��)�ϵ��������w�ϲŰl(f��)����,����Щ���W(xu��)���c�����|(zh��)�Y(ji��)��,����Щ�cDNA�Y(ji��)�ϣ���ôֻҪ�y(c��)���@Щ�a(ch��n)����܉��b���z���������|(zh��)�Ķ������ü���̶�[7],��
Ŀǰ,���y(c��)��DNA�Ӻ���ķ����ж�N�����`���Բ�ͬ,�������ɹ��ȷ�,����ЧҺ��ɫ�V����ø(li��n)���ߜy(c��)���z�y(c��)��ELISA����32P���(bi��o)ӛ���g(sh��)(32P Postlabeling Technique)��,������Ҫ�Ĝy(c��)��������32P���(bi��o)ӛ���g(sh��),���˷����ڭh(hu��n)���O(ji��n)�y(c��)�ϵõ��V���đ�(y��ng)��[8]��32P���(bi��o)ӛ���g(sh��)�y(c��)��DNA�Ӻ���Ĝy(c��)���������²��E��
1��DNA����ȡ,�����M����{�քe�õ���øK��RNAø����ȥ�������|(zh��)��RNA,��Ȼ��������ͷӡ��ȷ�/���촼���w�e��24/1������DNA��
2��DNAø��͘�(bi��o)ӛ,������С�������ø��Ƣ�������ø�M(j��n)��ø���,������T4������ἤø��γ-32P-ATP�M(j��n)�И�(bi��o)����
3��TLC���ӌ���,������Ʒ�c(di��n)��ODS TLC(��������ɫ�V)���ϣ�����DNA�Ӻ����DNA����ˮ����ɫ�V���ܵIJ,���x�Ӻ������������,����ͬ��DNA�Ӻ������PEI TLC(��x�ӽ��Q����ɫ�V)����x�ֱ�,��
4���Է������@Ӱ��Һ�Wӛ��(sh��)�ȷ���������
�˷��������(y��u)�c(di��n)�Ǚz�y(c��)������(qi��ng),����(y��ng)�÷����V,���əz�y(c��)�κλ������cDNA���B�ӣ������ǿ����ڭh(hu��n)���������Ʒ�ļӺ���y(c��)�����Д�Ӻ���Ķ���,��������Ʒ�������Ƿ��Н��ڵ��°�����,��ͬ�r(sh��)���ИO�ߵ��`����,���əz�y(c��)��1010��(g��)�A���е�1��(g��)DNA�Ӻ��ԓ�����ڶ��Զ����о��z���������|(zh��)��Ⱦ������ИO��ĝ�����
3.2 DNA �A����������ǼӺ��ԽY(ji��)��(g��u)�p������z�y(c��)
��Ⱦ���|(zh��)�����cDNA�γɼӺ�������DNA���Ӹ�׃��,��߀�����g������������͵ēp��,�����籽����-DNA�Ӻ���,���܉�ɔ_DNA����ø�����|(zh��)����K�ºϳ�DNA�ļ����^��,���Ķ�ʹ���γɵ�DNA��������,�����⣬���ɻ�Ҳ�܉�����DNA�p��,���@Щ��Դ���|(zh��)��(j��ng)���w���x�a(ch��n)�����^�����͚�����,��ͨ�^DNA�A��������ֱ�ӓp��DNA���������B���ʣ�Guanine��,�����ɻ��܉�ʹ�B���ʮa(ch��n)��8-�uÓ���B�գ�8-OH-dGUO������ʹ�B�����_�h(hu��n)�γ�2,��6������-4�u��-5-����������ण�FapyGua��,���@2�N���|(zh��)�������M(j��n)�ж����y(c��)��,���Ա��u(p��ng)���z���������|(zh��)��(du��)DNA�ēp���̶�[9�� 10],��
3.3 DNA朔��Ѽ���z�y(c��)
�ڼ�(x��)�����ձ������DNA朔���,������ʹ��(x��)����(n��i)�a(ch��n)����ǧ���f(w��n)��ȥ�A��λ�c(di��n)���������l�����@Щλ�c(di��n)Ѹ�ٱ��ޏ�(f��),�����@�N�Ɖ��g�ӌ�(d��o)��DNA朔��ѣ������DNA有A���āGʧ,�����@�N�p�����ޏ�(f��)��DNA�����Ϯa(ch��n)���R�r(sh��)�Ŀp϶�����x��ݗ������ɻ�Ҳ������DNA朔���,��
DNA�Ĝy(c��)����������ԭ�����ڸ�pH��,��ʹDNA׃�ԣ����p�DNAጷŵĆ��DNA����,���cDNA朔��ѵĔ�(sh��)����һ������,����(y��ng)ԓע��,����DNA������ȥ�A��λ�c(di��n)�γɵĆ��DNA���ѣ�Ҳ�ܱ��z�y(c��)����,��
��ԭ����,����һ��pH�͜ض��£�DNA���Ӄ�(n��i)�ιɔ���̎�l(f��)��朷��x,����һ���ĕr(sh��)�g��(n��i),��������p�DNA���c�����c(di��n)�Ĕ�(sh��)���ɷ��ȡ��@��ͨ�^�z��DNA���ӵ�������,�����C�������(du��)DNA������,�����w���E���£�1)�A����������(x��)����һ���ضȵİ��h(hu��n)���ЉA��̎��һ���r(sh��)�g,����(x��)����(j��ng)�O�̕r(sh��)�g��̎����(10s),�������Ȟ�0.02��0.03mol/�̵ĉA����Һ������
��һ�N�y(c��)��DNA朔��ѵķ������g(sh��)�����z�Ӿ,���ډA�ԗl���£�DNA�ڭ�֬�����z���|(zh��)���Ӿ,�������w���ʵIJ�ͬ,����������ͬ��DNA�õ����x����(j��ng)�^�廯���VȾɫ,��DNA���Ѻ����ױ��y(c��)������,�����z�Ӿ��(j��ng)�^���m��pH���Ƽȿɜy(c��)����朔��ѣ�Ҳ���Ԝy(c��)���p朔���[12,��13],��
���ǜy(c��)��Ҳ�Q��μ�(x��)�����z�Ӿ���g(sh��)(SCG),�����廯���VȾɫ���@ʾDNA��朔��Ѻ����Aȥ�A��λ�c(di��n)��SCG���g(sh��)��ԭ���ǣ������ڼ�(x��)���ѽ�Һ���������Ɖļ�(x��)��Ĥ,����Ĥ������Ĥ�Y(ji��)��(g��u),���@�Ӽ�(x��)����(n��i)�ĵ����|(zh��)��RNA�������ɷ־����M(j��n)�����z���U(ku��)ɢ���ѽ�Һ��,����DNA���������,�Ҿ��Ї�(y��n)�ܵij������Y(ji��)��(g��u)������ԭλ,��Ȼ���ÉA̎�����ډA�ԗl�����Ӿ,��DNA�������҉A׃�Ԟ��朣�����(x��)��DNA�ܓp���Aȥ�A��λ�c(di��n)�͆�朔���,�t��(hu��)���F(xi��n)�������^С��DNAƬ��,����늈�(ch��ng)��,��СDNAƬ�ξ͕�(hu��)�x�_��DNA�����z���ӺY�����(y��ng)�O�Ƅ�(d��ng)����������,���ʷQ�����nj�(sh��)�(y��n),��DNA�w�Ƶľ��x�͔�(sh��)���Ϳ���ָʾ朔��ѵĔ�(sh��)��[14]�����ǜy(c��)������(ji��n)��,������,����(j��ng)��(j��)����ˮ�h(hu��n)����Ⱦ���|(zh��)��(du��)��(x��)��DNA�p���z�y(c��)�еđ�(y��ng)�����кܶ���(b��o)��,��
������DNA朔��ѵĎN�z�y(c��)����,��ֵ��ע�����,�ڼ�(x��)����(n��i)���������ļ�(x��)�����x�^�̺ͱ�¶����Ⱦ���|(zh��),��������DNA���ѡ������΅^(q��)���������l���µ�朔��Ѻͮ����l���µ�朔��ѳɞ�z�y(c��)�P(gu��n)�I,����Q�ˆ��}��;�������x��һ��(g��)���m�Č�(du��)�շNȺ�������^,������Č�(du��)�շNȺ��(y��ng)��(d��ng)�]�н�(j��ng)����Ⱦ��������{�ȣ�����(j��ng)�v�c��(sh��)�(y��n)�NȺһ�ӵ���Ȼ�h(hu��n)��,����ô,���猍(sh��)�(y��n)�NȺ��朔��є�(sh��)�����ڌ�(du��)�շNȺ,���ͱ�����Ⱦ���|(zh��)��(du��)��(sh��)�(y��n)�NȺ����˓p��,��
4 ���}�cչ��
4.1������Ⱦ��������(bi��o)־�DNA�p���ęz�y(c��)�ṩ��һ�N�ֶ�,���Á����ԺͶ����^��DNA�p���γ�,���ɓp��������DNA�����^�̵ĸ�׃�͌�(du��)�нM���p��֮�g���P(gu��n)ϵ����Ŀǰȱ���˽�DNA�p���c���P(gu��n)�NȺ,��Ⱥ������B(t��i)ϵ�y(t��ng)ˮƽ��Ч��(y��ng)��ֱ��(li��n)ϵ,��������@������ӏ�(qi��ng)�о���
4.2��Ⱦ���|(zh��)��(du��)DNA���a(ch��n)�����R�r(sh��)����(y��ng)���ܕ�(hu��)���m(x��)һ�Εr(sh��)�g,�����m(x��)�r(sh��)�g���L(zh��ng)����ه���ЙC(j��)�w��(du��)�p��DNA�Ļ֏�(f��)����,���������õķ�ʽ�������¶�߀�Ǽ����¶����Ͷ���Ą������mȻDNA���ӽY(ji��)��(g��u)�ĸɔ_����(hu��)��(d��o)�¼�(x��)��������,������(hu��)���l(f��)�������},�������(hu��)�ɔ_DNA�ޏ�(f��)�����_��,������DNA��(hu��)����һϵ�еĺ��������Ⱦɫ�w����,�����Ⱦɫ�w���Q,�����γɺͷ�����(sh��)���������°�����,�������|(zh��)����ʧ�{(di��o)��[6],���@Щ���c�ЙC(j��)�w�ı��F(xi��n)�����P(gu��n)����Ҫ����һ���µļ��g(sh��)�c������z�y(c��)��Ⱦ���|(zh��)��(du��)�ЙC(j��)�w��Ӱ�,��
4.3��Ⱦ���|(zh��)ͨ��ֻ�Ժܵ͵ĝ�ȳ��F(xi��n)�ڭh(hu��n)����,��һ������@�ã��͕�(hu��)�ܿ챻�ⶾ,�������Ⱦ���|(zh��)ֻ������DNA�����ı���p��,�����⣬DNA�p�������Ҳ���^��,���ʜy(c��)��DNA�ĽY(ji��)��(g��u)�p���Դ����ஔ(d��ng)������y,��DNA�p���ęz�y(c��)���g(sh��)�����M(j��n)һ�����ƣ��`�����������,�������nj�(du��)�����ɻ������DNA�p��,��

ʹ����“��һ��”��������“���v�h(hu��n)���W(w��ng)”