��Ⱦ���|(zh��)�����DNA�p������z�y
ժҪ: ����h(hu��n)���е���Ⱦ���|(zh��)�܉�?q��)��C�w�z�����|(zh��)DNA��ɓp��,���@ЩDNA�p�������γ�DNA�Ӻ��DNA朔��Ѽ��A���ÓQ��,�y��DNA�p���܉�ӳ�z���������|(zh��)���C�w��Ӱ푳̶�,�����,��DNA�p���z�y�����u����Ⱦ���|(zh��)���О������Ҫ�����x���������c��B��Ŀǰ���еęz�yDNA�p���ķ���,����32P���(bi��o)ӛ���g(sh��),���A�Խ����������ǜy�����ȡ�����DNA�p������ͱ��^��,���y��DNA�Y(ji��)��(g��u)�p���Դ����ஔ(d��ng)������y,��DNA�p���ęz�y���g(sh��)����Mһ�����ƣ��`���Ⱥ͌�һ�����Mһ�����,��
�P(gu��n)�I�~�� ��Ⱦ���|(zh��) ;DNA�p�� ;�z�y ;�z������
1 ǰ��
�����(bi��o)־�Biomarker��,���������w��¶�ڭh(hu��n)�����W(xu��)���|(zh��)������W(xu��)Ч��(y��ng)��׃��[1]���@�NЧ��(y��ng)���l(f��)��������,������,���������О��������׃����[2],�������(bi��o)־����Á�z�y���u����Ⱦ���|(zh��)���h(hu��n)���|(zh��)����Ӱ푲������A(y��)��,���ڷ���ˮƽ�ϣ�ͨ����ø���x���Ե����p��DNA�Y(ji��)��(g��u)�ēp��,��������Ⱦ��������(bi��o)־��,��Ó�����Ǻ��ᣨDNA�������������w�ļ�����(n��i)�����z����Ϣ���d�w,���κ�DNA���ӵĮ���׃��������(d��o)���ص�����W(xu��)���[3],���Ļ��M��,������,�����w���NȺ��Ⱥ��IJ�ͬ�Ӵα��F(xi��n)��Ч��(y��ng),�����,��DNA�p�������(bi��o)־����о���Խ��Խ�ܵ��˂����P(gu��n)ע,�����Č���Ⱦ���|(zh��)�T��(d��o)�����DNA�Y(ji��)��(g��u)�p���͙C��,�������ڜy��DNA�p���ļ��g(sh��)�c�����M�оC����
2 DNA�Y(ji��)��(g��u)�p������C��
�ڼ����˃�(n��i),��DNA���ӱ�����һ�N�ڷ�(w��n)�B(t��i)�ͷǷ�(w��n)�B(t��i)֮�g�ĄӑB(t��i)ƽ�⡣�������l����,���Ƿ�(w��n)�B(t��i)ֻ�������^�̆��ӕr�ĕ��r�F(xi��n)����DNA��(f��)��,�������ڼ������x�е��S�C����ײ�������@�N��r��DNA�ēp���ܿ�ͱ��ޏ�(f��)[4],����׃���µķ�(w��n)���Y(ji��)��(g��u)��һ���֣����(f��)�ƺ��ޏ�(f��)��,����ʹ�C�w���������\�D(zhu��n)��
��Ⱦ���|(zh��)�M�������w��(n��i)��ͨ�����_�y�ЙC�w�����������x�^��,����(d��o)��DNA�Y(ji��)��(g��u)�l(f��)����׃,���Ķ��l(f��)��һϵ�м������}���ܶ�W(xu��)���|(zh��)��(j��ng)�^�w��(n��i)��øϵ�y(t��ng)�,���a(ch��n)�����g���x�a(ch��n)��,���@��Џ��H��ԵĴ��x����c֬�����,��RNA��DNA���H�����İl(f��)������(y��ng),���γɷ�(w��n)����(w��n)���ļӺ����Ⱦ���|(zh��)�cDNA�Y(ji��)�Ͼ��γ�DNA�Ӻ��DNA Adducts��,���ܶ��о��ѽ�(j��ng)�C��,����N�T׃��������Ԯa(ch��n)���cDNA�Y(ji��)���γ�DNA�Ӻ��DNA�Ӻ����c����ͻ׃�������P(gu��n),��������[���l(f��)��������Ҫ����[5],�����磬�S��ù���أºͱ����ŵď����°�����,������DNA��(j��ng)�����ɞ�h(hu��n)���������(d��o)�µ�,����Ⱦ���|(zh��)�cDNA���r�Y(ji��)�ϣ��������ĉA����λ����Щ�nj�һ��,����Щ�t��һ�̶��^��,����AFF�H�خ����������B���ʣ�-8λ�����黯���t�����ԭh(hu��n)���Ў����c��������ϵ�ȫ�����͵�ԭ��(�����B���������ϵĵ�����)�a(ch��n)���黯����,��DNA�Ӻ�����γɿ����Ǯa(ch��n)��DNAͻ׃�ĵ�һ�A��,���Ժ���l(f��)��ʹDNA朔��ѡ��A���ÓQ�͉A��ȱʧ��һϵ���¼���
�ܶ�����܉�����DNA�ֱ�Ӕ���,����������Ⱦ���|(zh��)��(j��ng)�^���x���ɵ����ɻ���ȥ�A��λ�c,���܉�����DNA���Ӄ�(n��i)��������I�Ĕ��ѡ���Ⱦ���|(zh��)Ҳ�ܸɔ_DNA�����,����,�����(f��)�ơ��������ޏ�(f��),���@Щ���܉�?q��)���׃�����A�������a��ȱʧ��,����Ⱦ���|(zh��)�����DNA�Y(ji��)��(g��u)��׃����C��Ҋ�±���
|
3 DNA�p���ęz�y
���ڭh(hu��n)�����}Խ��Խ�ܵ��P(gu��n)ע,���˂��ڲ���l(f��)չ�������`���ļ��g(sh��)��z�y���W(xu��)���cDNA������,���Ķ�ʹ�Ӻ�������������ı���,��DNA朔���(DNA Strand Break)�Ĕ�(sh��)���ȳɞ�DNA�p������Ҫָ��(bi��o),��
3.1 DNA�Ӻ��P��y��
�����(sh��)�h(hu��n)�������ﹲ�r�Y(ji��)�ϵ�������������Ҫ���õ����w�����ϣ�������a(ch��n)��ؓ��Ӱ�,���ЙC�����ﶾ�����úͻ��W(xu��)�°����^��,����������ض����W(xu��)�ﹲ�r�Y(ji��)�ϵ��������w�ϲŰl(f��)���ġ���Щ���W(xu��)���c�����|(zh��)�Y(ji��)��,����Щ�cDNA�Y(ji��)��,����ôֻҪ�y���@Щ�a(ch��n)����܉��b���z���������|(zh��)�Ķ������ü���̶�[7]��
Ŀǰ,���y��DNA�Ӻ���ķ����ж�N,�����`���Բ�ͬ�������ɹ��ȷ�,����ЧҺ��ɫ�V��,��ø(li��n)���ߜy���z�y��ELISA����32P���(bi��o)ӛ���g(sh��)(32P Postlabeling Technique)�ȡ�����Ҫ�Ĝy��������32P���(bi��o)ӛ���g(sh��),���˷����ڭh(hu��n)���O(ji��n)�y�ϵõ��V���đ�(y��ng)��[8],��32P���(bi��o)ӛ���g(sh��)�y��DNA�Ӻ���Ĝy���������²��E��
1��DNA����ȡ�����M����{�քe�õ���øK��RNAø����ȥ�������|(zh��)��RNA,��Ȼ��������ͷ�,���ȷ�/���촼���w�e��24/1������DNA��
2��DNAø��͘�(bi��o)ӛ,������С�������ø��Ƣ�������ø�M��ø���,������T4������ἤø��γ-32P-ATP�M�И�(bi��o)����
3��TLC���ӌ���,������Ʒ�c��ODS TLC(��������ɫ�V)����,������DNA�Ӻ����DNA����ˮ����ɫ�V���ܵIJ,���x�Ӻ������������,����ͬ��DNA�Ӻ������PEI TLC(��x�ӽ��Q����ɫ�V)����x�ֱ档
4���Է������@Ӱ��Һ�Wӛ��(sh��)�ȷ�������,��
�˷��������(y��u)�c�Ǚz�y������,����(y��ng)�÷����V���əz�y�κλ������cDNA���B��,�������ǿ����ڭh(hu��n)���������Ʒ�ļӺ���y�����Д�Ӻ���Ķ���,��������Ʒ�������Ƿ��Н��ڵ��°����á�ͬ�r���ИO�ߵ��`����,���əz�y��1010���A���е�1��DNA�Ӻ���,��ԓ�����ڶ��Զ����о��z���������|(zh��)��Ⱦ������ИO��ĝ�����
3.2 DNA �A����������ǼӺ��ԽY(ji��)��(g��u)�p������z�y
��Ⱦ���|(zh��)�����cDNA�γɼӺ�������DNA���Ӹ�׃��,��߀�����g������������͵ēp��,�����籽����-DNA�Ӻ���܉�ɔ_DNA����ø�����|(zh��),����K�ºϳ�DNA�ļ����^�̣��Ķ�ʹ���γɵ�DNA��������,������,�����ɻ�Ҳ�܉�����DNA�p�����@Щ��Դ���|(zh��)��(j��ng)���w���x�a(ch��n)�����^�����͚�����,��ͨ�^DNA�A��������ֱ�ӓp��DNA,���������B���ʣ�Guanine�������ɻ��܉�ʹ�B���ʮa(ch��n)��8-�uÓ���B�գ�8-OH-dGUO��,����ʹ�B�����_�h(hu��n)�γ�2,��6������-4�u��-5-����������ण�FapyGua�����@2�N���|(zh��)�������M�ж����y��,���Ա��u���z���������|(zh��)��DNA�ēp���̶�[9,�� 10]��
3.3 DNA朔��Ѽ���z�y
�ڼ������ձ������DNA朔���,������ʹ������(n��i)�a(ch��n)����ǧ���f��ȥ�A��λ�c,���������l�����@Щλ�cѸ�ٱ��ޏ�(f��)�����@�N�Ɖ��g�ӌ�(d��o)��DNA朔��ѣ������DNA有A���āGʧ,�����@�N�p�����ޏ�(f��)��DNA�����Ϯa(ch��n)���R�r�Ŀp϶��,���x��ݗ������ɻ�Ҳ������DNA朔��ѡ�
DNA�Ĝy����������ԭ�����ڸ�pH��,��ʹDNA׃��,�����p�DNAጷŵĆ��DNA�������cDNA朔��ѵĔ�(sh��)����һ������,����(y��ng)ԓע��,����DNA������ȥ�A��λ�c�γɵĆ��DNA����,��Ҳ�ܱ��z�y������
��ԭ����,����һ��pH�͜ض���,��DNA���Ӄ�(n��i)�ιɔ���̎�l(f��)��朷��x����һ���ĕr�g��(n��i),��������p�DNA���c�����c�Ĕ�(sh��)���ɷ���,���@��ͨ�^�z��DNA���ӵ������ԣ����C�������DNA������,�����w���E���£�1)�A����,����������һ���ضȵİ��h(hu��n)���ЉA��̎��һ���r�g��������(j��ng)�O�̕r�g��̎����(10s),�������Ȟ�0.02��0.03mol/�̵ĉA����Һ,������
��һ�N�y��DNA朔��ѵķ������g(sh��)�����z�Ӿ,���ډA�ԗl����,��DNA�ڭ�֬�����z���|(zh��)���Ӿ�������w���ʵIJ�ͬ,����������ͬ��DNA�õ����x,����(j��ng)�^�廯���VȾɫ��DNA���Ѻ����ױ��y������,�����z�Ӿ��(j��ng)�^���m��pH���Ƽȿɜy����朔���,��Ҳ���Ԝy���p朔���[12��13],��
���ǜy��Ҳ�Q��μ������z�Ӿ���g(sh��)(SCG),�����廯���VȾɫ���@ʾDNA��朔��Ѻ����Aȥ�A��λ�c,��SCG���g(sh��)��ԭ���ǣ������ڼ����ѽ�Һ���������Ɖļ���Ĥ����Ĥ������Ĥ�Y(ji��)��(g��u),���@�Ӽ�����(n��i)�ĵ����|(zh��),��RNA�������ɷ־����M�����z���Uɢ���ѽ�Һ��,����DNA���������,�Ҿ��Ї��ܵij������Y(ji��)��(g��u)������ԭλ��Ȼ���ÉA̎�����ډA�ԗl�����Ӿ,��DNA�������҉A׃�Ԟ���,��������DNA�ܓp���Aȥ�A��λ�c�͆�朔���,�t�����F(xi��n)�������^С��DNAƬ�Ρ���늈���,��СDNAƬ�ξ͕��x�_��DNA�����z���ӺY����ꖘO�Ƅ�,���������ǣ��ʷQ�����nj��,��DNA�w�Ƶľ��x�͔�(sh��)���Ϳ���ָʾ朔��ѵĔ�(sh��)��[14],�����ǜy��������������,����(j��ng)��,����ˮ�h(hu��n)����Ⱦ���|(zh��)������DNA�p���z�y�еđ�(y��ng)�����кܶ������
������DNA朔��ѵĎN�z�y����,��ֵ��ע�����,�ڼ�����(n��i)���������ļ������x�^�̺ͱ�¶����Ⱦ���|(zh��),��������DNA����,�������΅^(q��)���������l���µ�朔��Ѻͮ����l���µ�朔��ѳɞ�z�y�P(gu��n)�I����Q�ˆ��}��;�������x��һ�����m�Č��շNȺ�������^,������Č��շNȺ��(y��ng)��(d��ng)�]�н�(j��ng)����Ⱦ��������{��,������(j��ng)�v�c���NȺһ�ӵ���Ȼ�h(hu��n)��,����ô,���猍�NȺ��朔��є�(sh��)�����ڌ��շNȺ���ͱ�����Ⱦ���|(zh��)�����NȺ����˓p��,��
4 ���}�cչ��
4.1������Ⱦ��������(bi��o)־��,��DNA�p���ęz�y�ṩ��һ�N�ֶΣ��Á����ԺͶ����^��DNA�p���γ�,���ɓp��������DNA�����^�̵ĸ�׃�͌��нM���p��֮�g���P(gu��n)ϵ,����Ŀǰȱ���˽�DNA�p���c���P(gu��n)�NȺ,��Ⱥ������B(t��i)ϵ�y(t��ng)ˮƽ��Ч��(y��ng)��ֱ��(li��n)ϵ��������@������ӏ��о�,��
4.2��Ⱦ���|(zh��)��DNA���a(ch��n)�����R�r����(y��ng)���ܕ����m(x��)һ�Εr�g�����m(x��)�r�g���L����ه���ЙC�w���p��DNA�Ļ֏�(f��)����,���������õķ�ʽ�������¶�߀�Ǽ����¶����Ͷ���Ą���,���mȻDNA���ӽY(ji��)��(g��u)�ĸɔ_������(d��o)�¼������������������l(f��)�������},��������ɔ_DNA�ޏ�(f��)�����_��,������DNA������һϵ�еĺ��,������Ⱦɫ�w���������Ⱦɫ�w���Q,�����γɺͷ�����(sh��)��,�������°��������|(zh��)����ʧ�{(di��o)��[6],���@Щ���c�ЙC�w�ı��F(xi��n)�����P(gu��n),����Ҫ����һ���µļ��g(sh��)�c������z�y��Ⱦ���|(zh��)���ЙC�w��Ӱ푡�
4.3��Ⱦ���|(zh��)ͨ��ֻ�Ժܵ͵ĝ�ȳ��F(xi��n)�ڭh(hu��n)����,��һ������@��,���͕��ܿ챻�ⶾ�������Ⱦ���|(zh��)ֻ������DNA�����ı���p��,������,��DNA�p�������Ҳ���^�࣬�ʜy��DNA�ĽY(ji��)��(g��u)�p���Դ����ஔ(d��ng)������y,��DNA�p���ęz�y���g(sh��)�����Mһ������,���`����������ߣ������nj������ɻ������DNA�p��,��

ʹ����“��һ��”��������“���v�h(hu��n)���W(w��ng)”