��Ⱦ���|�����DNA�p������z�y
ժҪ: ����h(hu��n)���е���Ⱦ���|�܉C�w�z�����|DNA��ɓp��,���@ЩDNA�p�������γ�DNA�Ӻ��DNA朔��Ѽ��A���ÓQ��,�y��DNA�p���܉�ӳ�z���������|���C�w��Ӱ푳̶�,�����,��DNA�p���z�y�����u����Ⱦ���|���О������Ҫ�����x���������c��B��Ŀǰ���еęz�yDNA�p���ķ���,����32P���ӛ���g,���A�Խ����������ǜy�����ȡ�����DNA�p������ͱ��^��,���y��DNA�Y���p���Դ����ஔ������y,��DNA�p���ęz�y���g����Mһ�����ƣ��`���Ⱥ͌�һ�����Mһ�����,��
�P�I�~�� ��Ⱦ���| ;DNA�p�� ;�z�y ;�z������
1 ǰ��
�����־�Biomarker��,���������w��¶�ڭh(hu��n)�����W���|������WЧ����׃��[1]���@�NЧ�����l(f��)��������,������,���������О��������׃����[2],�������־����Á�z�y���u����Ⱦ���|���h(hu��n)���|����Ӱ푲������A��,���ڷ���ˮƽ�ϣ�ͨ����ø���x���Ե����p��DNA�Y���ēp��,��������Ⱦ��������־��,��Ó�����Ǻ��ᣨDNA�������������w�ļ����ȣ����z����Ϣ���d�w���κ�DNA���ӵĮ���׃�����������ص�����W���[3],���Ļ���,���M��������,�����w,���NȺ��Ⱥ��IJ�ͬ�Ӵα��F(xi��n)��Ч��,�����,��DNA�p�������־����о���Խ��Խ�ܵ��˂����Pע,�����Č���Ⱦ���|�T�������DNA�Y���p���͙C��,�������ڜy��DNA�p���ļ��g�c�����M�оC����
2 DNA�Y���p������C��
�ڼ����˃�,��DNA���ӱ�����һ�N�ڷ�(w��n)�B(t��i)�ͷǷ�(w��n)�B(t��i)֮�g�ĄӑB(t��i)ƽ��,���������l���£��Ƿ�(w��n)�B(t��i)ֻ�������^�̆��ӕr�ĕ��r�F(xi��n)����DNA����,�������ڼ������x�е��S�C����ײ��,�����@�N��r��DNA�ēp���ܿ�ͱ��ޏ�[4]����׃���µķ�(w��n)���Y����һ���֣�����ƺ��ޏͣ�,����ʹ�C�w���������\�D,��
��Ⱦ���|�M�������w�Ⱥ�ͨ�����_�y�ЙC�w�����������x�^�̣�����DNA�Y���l(f��)����׃,���Ķ��l(f��)��һϵ�м������}���ܶ�W���|���^�w�ȵ�øϵ�y(t��ng)�,���a�����g���x�a��,���@��Џ��H��ԵĴ��x����c֬�����,��RNA��DNA���H�����İl(f��)������,���γɷ�(w��n)����(w��n)���ļӺ����Ⱦ���|�cDNA�Y�Ͼ��γ�DNA�Ӻ��DNA Adducts��,���ܶ��о��ѽ��C��,����N�T׃��������Ԯa���cDNA�Y���γ�DNA�Ӻ��DNA�Ӻ����c����ͻ׃�������P,��������[���l(f��)��������Ҫ����[5],�����磬�S��ù���أºͱ����ŵď����°�����,������DNA�������ɞ�h(hu��n)����������µ�,����Ⱦ���|�cDNA���r�Y�ϣ��������ĉA����λ����Щ�nj�һ��,����Щ�t��һ�̶��^��,����AFF�H�خ����������B���ʣ�-8λ,�����黯���t�����ԭh(hu��n)���Ў����c��������ϵ�ȫ�����͵�ԭ��(�����B���������ϵĵ�����)�a���黯���á�DNA�Ӻ�����γɿ����Ǯa��DNAͻ׃�ĵ�һ�A��,���Ժ���l(f��)��ʹDNA朔���,���A���ÓQ�͉A��ȱʧ��һϵ���¼���
�ܶ�����܉�����DNA�ֱ�Ӕ���,����������Ⱦ���|���^���x���ɵ����ɻ���ȥ�A��λ�c,���܉�����DNA���Ӄ���������I�Ĕ��ѡ���Ⱦ���|Ҳ�ܸɔ_DNA�����,����,������ơ��������ޏ�,���@Щ���܉���׃�����A�������a��ȱʧ��,����Ⱦ���|�����DNA�Y����׃����C��Ҋ�±���
|
3 DNA�p���ęz�y
���ڭh(hu��n)�����}Խ��Խ�ܵ��Pע,���˂��ڲ���l(f��)չ�������`���ļ��g��z�y���W���cDNA������,���Ķ�ʹ�Ӻ�������������ı���,��DNA朔���(DNA Strand Break)�Ĕ�(sh��)���ȳɞ�DNA�p������Ҫָ��,��
3.1 DNA�Ӻ��P��y��
�����(sh��)�h(hu��n)�������ﹲ�r�Y�ϵ�������������Ҫ���õ����w�����ϣ�������a��ؓ��Ӱ�,���ЙC�����ﶾ�����úͻ��W�°����^��,����������ض����W�ﹲ�r�Y�ϵ��������w�ϲŰl(f��)���ġ���Щ���W���c�����|�Y��,����Щ�cDNA�Y��,����ôֻҪ�y���@Щ�a����܉��b���z���������|�Ķ������ü���̶�[7]��
Ŀǰ,���y��DNA�Ӻ���ķ����ж�N,�����`���Բ�ͬ�������ɹ��ȷ�,����ЧҺ��ɫ�V��,��ø(li��n)���ߜy���z�y��ELISA����32P���ӛ���g(32P Postlabeling Technique)�ȡ�����Ҫ�Ĝy��������32P���ӛ���g,���˷����ڭh(hu��n)���O(ji��n)�y�ϵõ��V���đ���[8],��32P���ӛ���g�y��DNA�Ӻ���Ĝy���������²��E��
1��DNA����ȡ�����M����{�քe�õ���øK��RNAø����ȥ�������|��RNA,��Ȼ��������ͷ�,���ȷ�/���촼���w�e��24/1������DNA��
2��DNAø��͘�ӛ������С�������ø��Ƣ�������ø�M��ø���,������T4������ἤø��γ-32P-ATP�M�И˶�,��
3��TLC���ӌ���������Ʒ�c��ODS TLC(��������ɫ�V)����,������DNA�Ӻ����DNA����ˮ����ɫ�V���ܵIJ,���x�Ӻ������������,����ͬ��DNA�Ӻ������PEI TLC(��x�ӽ��Q����ɫ�V)����x�ֱ档
4���Է������@Ӱ��Һ�Wӛ��(sh��)�ȷ�������,��
�˷��������(y��u)�c�Ǚz�y������,�����÷����V���əz�y�κλ������cDNA���B��,�������ǿ����ڭh(hu��n)���������Ʒ�ļӺ���y�����Д�Ӻ���Ķ���,��������Ʒ�������Ƿ��Н��ڵ��°����á�ͬ�r���ИO�ߵ��`����,���əz�y��1010���A���е�1��DNA�Ӻ���,��ԓ�����ڶ��Զ����о��z���������|��Ⱦ������ИO��ĝ�����
3.2 DNA �A����������ǼӺ��ԽY���p������z�y
��Ⱦ���|�����cDNA�γɼӺ�������DNA���Ӹ�׃��,��߀�����g������������͵ēp��,�����籽����-DNA�Ӻ���܉�ɔ_DNA����ø�����|,����K�ºϳ�DNA�ļ����^��,���Ķ�ʹ���γɵ�DNA�������㡣����,�����ɻ�Ҳ�܉�����DNA�p��,���@Щ��Դ���|�����w���x�a�����^�����͚�������ͨ�^DNA�A��������ֱ�ӓp��DNA,���������B���ʣ�Guanine��,�����ɻ��܉�ʹ�B���ʮa��8-�uÓ���B�գ�8-OH-dGUO������ʹ�B�����_�h(hu��n)�γ�2,��6������-4�u��-5-����������ण�FapyGua�����@2�N���|�������M�ж����y��,���Ա��u���z���������|��DNA�ēp���̶�[9,�� 10]��
3.3 DNA朔��Ѽ���z�y
�ڼ������ձ������DNA朔���,������ʹ�����Ȯa����ǧ���f��ȥ�A��λ�c,���������l�����@Щλ�cѸ�ٱ��ޏͣ����@�N�Ɖ��g�ӌ���DNA朔��ѣ������DNA有A���āGʧ,�����@�N�p�����ޏ���DNA�����Ϯa���R�r�Ŀp϶��,���x��ݗ������ɻ�Ҳ������DNA朔��ѡ�
DNA�Ĝy����������ԭ�����ڸ�pH�£�ʹDNA׃��,�����p�DNAጷŵĆ��DNA����,���cDNA朔��ѵĔ�(sh��)����һ����������ԓע��,����DNA������ȥ�A��λ�c�γɵĆ��DNA����,��Ҳ�ܱ��z�y������
��ԭ����,����һ��pH�͜ض���,��DNA���ӃȆιɔ���̎�l(f��)��朷��x����һ���ĕr�g��,��������p�DNA���c�����c�Ĕ�(sh��)���ɷ���,���@��ͨ�^�z��DNA���ӵ������ԣ����C�������DNA������,�����w���E���£�1)�A����,����������һ���ضȵİ��h(hu��n)���ЉA��̎��һ���r�g���������O�̕r�g��̎����(10s),�������Ȟ�0.02��0.03mol/�̵ĉA����Һ,������
��һ�N�y��DNA朔��ѵķ������g�����z�Ӿ,���ډA�ԗl����,��DNA�ڭ�֬�����z���|���Ӿ�������w���ʵIJ�ͬ,����������ͬ��DNA�õ����x,�����^�廯���VȾɫ,��DNA���Ѻ����ױ��y�����������z�Ӿ���^���m��pH���Ƽȿɜy����朔���,��Ҳ���Ԝy���p朔���[12,��13]��
���ǜy��Ҳ�Q��μ������z�Ӿ���g(SCG),�����廯���VȾɫ���@ʾDNA��朔��Ѻ����Aȥ�A��λ�c,��SCG���g��ԭ���ǣ������ڼ����ѽ�Һ���������Ɖļ���Ĥ����Ĥ������Ĥ�Y��,���@�Ӽ����ȵĵ����|,��RNA�������ɷ־����M�����z���Uɢ���ѽ�Һ��,����DNA���������,�Ҿ��Ї��ܵij������Y��������ԭλ��Ȼ���ÉA̎�����ډA�ԗl�����Ӿ,��DNA�������҉A׃�Ԟ���,��������DNA�ܓp���Aȥ�A��λ�c�͆�朔���,�t�����F(xi��n)�������^С��DNAƬ�Ρ���늈���,��СDNAƬ�ξ͕��x�_��DNA�����z���ӺY����ꖘO�Ƅ�,���������ǣ��ʷQ�����nj��,��DNA�w�Ƶľ��x�͔�(sh��)���Ϳ���ָʾ朔��ѵĔ�(sh��)��[14],�����ǜy��������������,������,����ˮ�h(hu��n)����Ⱦ���|������DNA�p���z�y�еđ������кܶ������
������DNA朔��ѵĎN�z�y����,��ֵ��ע�����,�ڼ����ȟ��������ļ������x�^�̺ͱ�¶����Ⱦ���|,��������DNA����,�������΅^(q��)���������l���µ�朔��Ѻͮ����l���µ�朔��ѳɞ�z�y�P�I����Q�ˆ��}��;�������x��һ�����m�Č��շNȺ�������^,������Č��շNȺ�����]�н�����Ⱦ��������{��,�������v�c���NȺһ�ӵ���Ȼ�h(hu��n)������ô,���猍�NȺ��朔��є�(sh��)�����ڌ��շNȺ,���ͱ�����Ⱦ���|�����NȺ����˓p����
4 ���}�cչ��
4.1������Ⱦ��������־��,��DNA�p���ęz�y�ṩ��һ�N�ֶ�,���Á����ԺͶ����^��DNA�p���γɡ��ɓp��������DNA�����^�̵ĸ�׃�͌��нM���p��֮�g���Pϵ,����Ŀǰȱ���˽�DNA�p���c���P�NȺ��Ⱥ������B(t��i)ϵ�y(t��ng)ˮƽ��Ч����ֱ��(li��n)ϵ,��������@������ӏ��о�,��
4.2��Ⱦ���|��DNA���a�����R�r�������ܕ����m(x��)һ�Εr�g�����m(x��)�r�g���L����ه���ЙC�w���p��DNA�Ļ֏�����,���������õķ�ʽ�������¶�߀�Ǽ����¶����Ͷ���Ą���,���mȻDNA���ӽY���ĸɔ_�������¼������������������l(f��)�������},��������ɔ_DNA�ޏ͵����_�ԡ�����DNA������һϵ�еĺ��,������Ⱦɫ�w����,�����Ⱦɫ�w���Q,�����γɺͷ�����(sh��)���������°�����,�������|����ʧ�{��[6],���@Щ���c�ЙC�w�ı��F(xi��n)�����P����Ҫ����һ���µļ��g�c������z�y��Ⱦ���|���ЙC�w��Ӱ�,��
4.3��Ⱦ���|ͨ��ֻ�Ժܵ͵ĝ�ȳ��F(xi��n)�ڭh(hu��n)����,��һ������@��,���͕��ܿ챻�ⶾ,�������Ⱦ���|ֻ������DNA�����ı���p��������,��DNA�p�������Ҳ���^��,���ʜy��DNA�ĽY���p���Դ����ஔ������y��DNA�p���ęz�y���g�����Mһ������,���`�����������,�������nj������ɻ������DNA�p����
ʹ����“��һ��”��������“���v�h(hu��n)���W”