���x�����ؽM���̾����������Uˮ
1 ��(sh��)�(y��n)����
��(sh��)�(y��n)�����õľ����B�T��W(xu��)���W(xu��)�����c���﹤��ϵ���﹤�̌�(sh��)�(y��n)�����ô��c�U��E.coliBL21(DE3)������������(j��ng)���й��ٿv�ӻ���ͽ������a������ؽM�|(zh��)���D(zhu��n)�����õ��Ļ��̾�,�����ٿv�ӻ����ڼ�(x��)��Ĥ̎���_(d��)�����خ��Ե���Ĥ���Y(ji��)�ϵ��̓�(n��i)Ĥ���D(zhu��n)�\(y��n)���ף�ͬ�r(sh��)���������ڼ�(x��)���w��(n��i)���_(d��)�����ؽ����и߽Y(ji��)�������Ľ�����,����������һ�M���������ĵͷ����������|(zh��),�����ȿɸ������ؽY(ji��)���ؽ����x�ӣ��ֿ��ڼ�(x��)���w��(n��i)�����ؽ����x�ӌ���(x��)�������Ķ�������,��������ؽM����ĺY�x,�����ؽM�|(zh��)���������˰��S(Amp)�Ϳ���(Kan)�ɷN�������x���Ԙ�(bi��o)ӛ��
�������B(y��ng)����LB���B(y��ng)��(g/L)��������10.0,����ĸ��ȡ��5.0,��NaClO��
![]() |
2 ��(sh��)�(y��n)����
2.1���N����
��500mL�uƿ�Ќ��ؽM���ӷN��200mL��50mg/L���Sù�غ�30mg/L����ù�ص�LB���B(y��ng)����,����37������ʎ���B(y��ng)��OD600�s��4(��ʎ���ʞ�170min),����1.5mL�o�����x�Ĺ��м���870 L��(x��)����Һ�к�130 L88%�ĸ��ͣ���Ϻ���Һ������,��Ȼ����-80��,��
2.2���x�ӵ����︻��
��l000mL�uƿ���b��300mLLB���B(y��ng)Һ������50mg/L���Sù�غ�30mg/L����ù��,��Ȼ�����lmI��(x��)�����������B(y��ng)Һ,����37������ʎ(��ʎ���ʞ�170rain)���B(y��ng)���^ҹ.ȡ������Һ�ӷN����ͬ��LB���B(y��ng)Һ�У�ʹ��ʼ���w�ܶȞ�OD400ֵ0.1��0.3��37������ʎ���B(y��ng)��OD6000.5��0.7�r(sh��)�����T��(d��o)�ﮐ���������������(IPTG)���K��Ȟ�1.0mM.�ٴ���ʎ���B(y��ng)4h,��4�����x���ի@���w����.���w��ʹ��ǰ�������ᾏ�_Һϴ��,��Ȼ��Ҹ��ں���ͬ��ȹ��x�ӵ�ģ�M늽�Uˮ�У���37������ʎ���B(y��ng)1h,���x���ռ����w,����y�����w��(n��i)�������Ĺ��x�Ӻ��������ռ��ľ��w�������70%�ĸ���������Һ�����^ҹ,�,����츻�����ʕr(sh��)���ڲ�ͬ�ĕr(sh��)�g��0.2 m���Ĵ����w�SĤ�ռ����w,����ʹ���w��̎��Һ�M����x�_��,�������ؽ����x�����ڱ�����������������(d��o)��(sh��)�(y��n)�`���(sh��)�(y��n)�����õ����Ќ�(d��o)�ܺͲ�������ʹ��ǰ����20%��������Һ�����^ҹ,��Ȼ����ȥ�x��ˮ��ϴ�Ƀ�,��
3 �Y(ji��)Փ
��(j��ng)�ؽM�����D(zhu��n)���Ļ��̾����к�(qi��ng)�ďďUˮ�и������x�ӵ��������Uˮ�й����x�ӵĴ��ڼӿ����ؽM���ĸ�������,�����s��(d��o)�¾��w��ƽ�⸻�������½���30%,��pH��׃�����ؽM���ĸ����О�Ӱ푺�С�����ؽM�������x�ӵĸ���������һ��������������к����@�����,��

ʹ����“��һ��”��������“���v�h(hu��n)���W(w��ng)”